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細胞簡介:
腎小球為血液過濾器,腎小球壁構成過濾膜。腎小球過濾膜從內到外有三層結構:內層為內皮、中層為腎小球基膜、外層為上皮細胞層,上皮細胞又稱足細胞,其不規(guī)則突起稱足突,其間有許多狹小間隙,血液經(jīng)濾膜過濾后,濾液入腎小球囊。在正常情況下,血液中絕大部分蛋白質不能濾過而保留于血液中,僅小分子物質如尿素、葡萄糖、電解質及某些小分子蛋白能濾過。
腎足細胞即腎小球上皮細胞,它附著于腎小球基底膜的外側,連同腎小球基底膜和腎小球基膜一起構成了腎小球血液濾過屏障。又由于正常成年機體的腎臟足細胞是一種終末分化細胞,體外培養(yǎng)的原代細
商品屬性:
產品名稱 |
種屬 |
人 |
|
組織來源 |
腎臟組織 |
規(guī)格 |
5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶 |
貨號 |
A01X1331 |
細胞形態(tài) |
不規(guī)則 含足突細胞 |
培養(yǎng)條件 |
氣相:空氣,95%;CO2,5% |
生長特性 |
貼壁培養(yǎng) |
細胞特性:
1)細胞來源于人正常腎臟組織。
2)細胞鑒定:廣譜角蛋白(PCK)或WT-1(Wilm'sTumorProtein)熒光染色為陽性。
3)經(jīng)鑒定細胞純度高于90%。
4)不含有 HIV-1、 HBV、HCV、支原體、、酵母和。
5)細胞生長方式:不規(guī)則,含足突細胞,貼壁培養(yǎng)。
推薦培養(yǎng)基:
我們推薦使用 Delf 原代腎足細胞 培養(yǎng)體系 作為體外培養(yǎng)的培養(yǎng)基。
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原代細胞的培養(yǎng)條件:
① 靜置貼壁細胞(包括半貼壁細胞的培養(yǎng))培養(yǎng)
a 細胞要通過充分漂洗,以盡量除去消化液的毒性
b 細胞接種時濃度要稍大一些,至少為5×108細胞/L。
c 培養(yǎng)基可用Eagle(MEM Corning 10-010-CVR)或DMEM(Corning 10-013-CVR)培養(yǎng)。
d 胎牛血清濃度為10%-80%。
e 應在37℃5% CO2的培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。。
f 在起始的2天中盡量減少振蕩,以防止剛貼壁的細胞發(fā)生脫落,漂浮。
g 待細胞基本貼壁伸展并逐漸形成網(wǎng)狀,應將原代細胞換液
h 用骨髓或外周血中的懸浮細胞經(jīng)靜置培養(yǎng)1周時,應將細胞懸液經(jīng)低速離心后換液。
② 懸浮細胞的培養(yǎng)要求
a 原代培養(yǎng)時要盡量去除紅細胞
b 短期培養(yǎng),可在含10%小牛血清的RPMI1640培養(yǎng)基中進行
c 細胞濃度可在5-8×109/L范圍內,進行分瓶試驗。
d 長期培養(yǎng)時,細胞中要加入生長因子,白血病細胞中要加入少量的原患者血清,以利細胞生長。
f 細胞換液一般每隔3天需半量換液一次
g 細胞傳代一般待細胞增殖加快、細胞密度較高時才能進行。