商品屬性：
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貨號 |
規(guī)格 |
產(chǎn)品名稱 |
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A-PJ1117-100U |
100U |
南極熱敏UDG |
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A-PJ1117-500U |
500U |
南極熱敏UDG |
儲存條件：
南極熱敏UDG置于-20°C 可保存 2 年。
產(chǎn)品介紹：
南極熱敏 UDG 是來源于嗜冷海洋**經(jīng)大腸桿菌表達純化的的重組蛋白。
該酶能有效地水解單鏈或雙鏈DNA 上的尿嘧啶，產(chǎn)生的缺嘧啶位點，在高溫或高 pH下，極易水解斷裂。該酶對 RNA 無活性，主要用于 PCR擴增產(chǎn)物的防污染。大腸桿菌來源的尿嘧啶-DNA 糖基化酶較為耐熱，經(jīng) 95℃10min 處理仍會殘留有少量的尿嘧啶-DNA 糖基化酶活性，導致含有 dU 堿基的 PCR 產(chǎn)物的降解。
而來源于嗜冷海洋**的熱敏型 UDG 在 50℃5min 即完全失活，在進行 PCR 擴增前，在 PCR 混合液中添加尿嘧啶-DNA 糖基化酶（熱敏性），25℃ 2min 即可消除以往 PCR 產(chǎn)物的殘留污染，由于尿嘧啶-DNA 糖基化酶（熱敏性）在 PCR 循環(huán)的 94℃變性一步便可被滅活，因此不會影響新的含 dU 的 PCR 產(chǎn)物。
活性定義：
在標準反應體系下，37°C 每分鐘催化 60 pmol尿嘧啶從含尿嘧啶的雙鏈 DNA 上釋放所需要的酶量為一個活性單位。
反應 Buffer：
ThermoLabile Uracil DNA Glycosylase (UDG)與絕大多數(shù)的 PCR 聚合酶反應緩沖液都是兼容的，但在高離子濃度(>100 mM)下活性會受到抑制。在防污染 PCR 中的使用濃度推薦為 10 mU-50 mU/μ（l 25℃下作用 2min 即可），在不同的緩沖系統(tǒng)下可能會有差別。
酶儲存液：20 mM Tris-HCl, 50 mM NaCl, 1 mM DTT, ,50% Glycerol, 0.1% (w/v) Triton X-100, pH 7.5。
熱失活：50°C，5min。
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