商品屬性：
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貨號(hào) |
規(guī)格 |
產(chǎn)品名稱 |
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A-PJ1086-10T |
10T |
Gibson無(wú)縫克隆試劑盒 |
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A-PJ1086-50T |
50T |
Gibson無(wú)縫克隆試劑盒 |
儲(chǔ)存條件：
Gibson無(wú)縫克隆試劑盒-20℃可保存 2 年，-80℃可保存 5 年，避免反復(fù)凍融。
產(chǎn)品介紹：
Gibson 無(wú)縫連接試劑盒是一種混合酶系統(tǒng)，其可將任意方法線性化的載體和與其兩端具有重疊區(qū)域的一個(gè)或多個(gè) PCR 片段定向重組連接。該方法不依賴于 T4 DNA 連接酶，不受載體和目的片段的酶切位點(diǎn)限制，可在 30 分鐘內(nèi)實(shí)現(xiàn) PCR 片段高效定向無(wú)縫克隆至載體的任意位置，從而獲得完整的雙鏈 DNA 分子。該試劑盒使用簡(jiǎn)單，只需加入合適比例的載體和 PCR 片段在室溫孵育 15-30min 即可完成片段的連接。
原理：
T5 外切酶可從雙鏈 DNA5'端切割形成 3'突出末端， 從而促進(jìn)重疊區(qū)域的具有互補(bǔ)序列的片段進(jìn)行退火。高保真 DNA 聚合酶可使退火的片段向 3'端延伸，從而填補(bǔ)片段缺口。Taq DNA 連接酶可封閉缺刻從而獲得完整的雙鏈 DNA 分子。
優(yōu)勢(shì)：
1. 室溫孵育即可完成片段的連接,無(wú)需 50℃。
2. 不受載體或插入片段酶切位點(diǎn)限制在任意位置進(jìn)行無(wú)縫克隆
3. 不依賴于 T4 連接酶，高效連接，無(wú)堿基缺失
4. 可同時(shí)高效連接一個(gè)或多個(gè) PCR 片段
5. 無(wú)需額外的亞克隆，菌檢陽(yáng)性率高達(dá) 95%
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