ELISA試驗(yàn)洗滌過(guò)程注意事項(xiàng)：

聚苯乙烯因其具有較強(qiáng)的吸附蛋白質(zhì)的性能而被廣泛用于ELISA實(shí)驗(yàn)的固相載體，聚苯乙烯等塑料對(duì)蛋白質(zhì)的吸附是普遍性的，因此需要通過(guò)洗滌清 除在反應(yīng)過(guò)程中非特異性地吸附于固相載體的干擾物質(zhì)。洗滌在 ELISA 過(guò)程中雖不是一個(gè)反應(yīng)步驟，但卻決定著實(shí)驗(yàn)的成敗。上述提到的血清中存在紅細(xì)胞或纖維蛋白原，可以在加樣前離心時(shí)得到控制，同樣也可以通過(guò)適當(dāng)增加洗滌次數(shù)和浸泡時(shí)間減輕或避免對(duì)實(shí)驗(yàn)結(jié)果的影響，同樣，對(duì)于血液存在的非特異性的IgG,實(shí)驗(yàn)者很難在加樣時(shí)將其去除，那么解決的合適時(shí)機(jī)就是洗滌過(guò)程。

ELISA在洗滌過(guò)程中需注意以下幾點(diǎn)：

1、板要平整，尤其是在用洗板機(jī)洗板的過(guò)程中，往往是3排一起洗，如果板不平，就很可能造成洗液有殘留，從而導(dǎo)致非特異性結(jié)合不能清 除干凈，對(duì)實(shí)驗(yàn)結(jié)果造成干擾。

2、洗液溫度，實(shí)驗(yàn)表明，洗液溫度也會(huì)影響洗板的干凈程度，尤其是冬天溫度過(guò)低時(shí)容易出現(xiàn)“花板”問(wèn)題。因此，保持室溫在20℃-30℃。

3、洗液要注滿孔，孔壁洗滌不干凈也易造成“花板”現(xiàn)象。

4、洗液要新鮮配置，洗液要臨用前新鮮配制，放置時(shí)間過(guò)長(zhǎng)易產(chǎn)生絮狀物或混濁，造成賭孔或花板。

5、洗板次數(shù)不夠或洗滌間隔時(shí)間過(guò)短也會(huì)造成由于洗板不凈而造成“花板”。